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| Aufgabe | Wieviel DNA kann mit PCR wirklich produziert werden?
Die wirkliche Ausbeute:
Template DNA: 10 pg/100 µl
dNTP:200 µM (pro Nukleotid)
Primer: 500 nM
Wieviel DNA kann mit den vorhandenen Nukleotiden theoretisch synthetisiert werden?
dNTP (gesamt) = 800 µM = 800 µmol/l = 80 nmol/100 µl
1 mol dNTP ca. 330 g => 80 nmol = 26.4 µg
bezogen auf das 600 bp PCR Fragemnt: ca. 130 pmol/100 µl
Primer (gesamt) 1 µM = 1 µmol/l = 100 pmol/100 µl
=> Reduktion der max. Menge auf ca. 20 µg |
Guten Abend,
unser Dozent hat uns heute diesen Loesungsweg gegeben. Jedoch verstehe ich hier nur Bahnhof. Ich verstehe nicht wie ich auf diese 130pmol/100ul kommen soll und wie ich auf 100pmol/100ul Primer kommen sol und wie mir das hilft auf die 20ug DNA zu kommen.
Es geht um die PCR, die ja eigentlich exponentiell DNA herstellt, jedoch auf Grund der nicht unendlich vorhandene Materialen nicht so viel herstellen kann. Es geht darum die Menge zu berechnen. In Wirklichkeit waere es ja sogar noch weniger, da die Polymerase eine Halbwertszeit hat, etc.
Ich waere Froh um jede Hilfe,
liebe Gruesse,
Stephanie
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(Mitteilung) Reaktion unnötig  | | Datum: | 18:20 Sa 14.05.2016 | | Autor: | matux |
$MATUXTEXT(ueberfaellige_frage)
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